Фенотипирование крови что это такое

Иммунофенотипирование лимфоцитов: показания, показатели

Фенотипирование крови что это такое
Иммунофенотипирование лимфоцитов является одним из методов, применяемых в клинической диагностике. Его основа — особая реакция, отмечаемая между антигенами и антителами.

Она применяется для определения, какой тип кровяных клеток имеет место в исследуемом материале. При работе используются особые метки, которые соединены с антигенами.

Они позволяют отслеживать реакции в материале и фиксировать количество исследуемых клеток крови. Знание объёма вида тех или иных клеток помогает в диагностике опухолевых процессов.

Метод исследования, условия, необходимые для проведения

Для проведения исследования необходима венозная кровь

При исследовании определяется принадлежность клеток крови к тому или иному виду. Для проведения анализа требуется использование специального оборудования — цитофлюориметра. Также могут применяться микроскопы, при помощи которых фиксируют люминесцирующие метки и проводят их точный подсчёт. Оборудование должно давать возможность опознать каждую специальную метку в исследуемом материале.

Кровь для исследования берут из вены утром. Обычно приём пищи запрещается за 10 часов до процедуры. Исключаются физические и эмоциональные нагрузки перед анализом, а также употребление алкоголя.

Забор крови производят в вакуумную пробирку.

Кровь в пробирке обязательно перемешивают, медленно переворачивая ёмкость 10 раз. Транспортируют в лабораторию материал при температуре от 18 до 23 градусов, вертикально установив пробирку. Максимальный срок хранения взятого материала сутки. Само исследование занимает менее 5 часов.

Количественный состав каких клеток отражает результат анализа?

Интерес представляют клетки лимфоцитарного ряда

При исследовании интерес представляют несколько видов клеток. В бланке исследования будут зафиксированы полученные данные.

  1. Здоровые полноценные лимфоциты. Фиксируется абсолютное количество лимфоцитов, которые не деформированы, имеют правильное круглое ядро. Патологические изменения в них отсутствуют.
  2. Лимфоциты Т-клеточные. Ядро клеток формируется в вилочковой железе и тимусе. Клетки контролируют работу В-лимфоцитов, образующих ряд антител.
  3. Количество Т-хелперов. Одна из разновидностей T-лимфоцитов. Они обеспечивают правильный иммунный ответ организма при обнаружении чужеродного антигена. Данные клетки первого типа предупреждают развитие раковых клеток, а второго — действуют на агрессивные аллергены.
  4. Лимфоциты Т-цитотоксические. Они отвечают за уничтожение собственных клеток организма, если они поражены. Это свойство помогает противостоять опухолевым процессам, тяжёлыми бактериальными заболеваниями, когда возбудитель паразитирует внутри клетки.
  5. В-лимфоциты. Отвечают за выработку веществ, которые отвечают за правильность работы гуморального иммунитета.
  6. ЕК-клетки. Это естественные киллеры, действие которых избирательное и направленное на клетки с неопластическими изменениями.
  7. ЕКТ. Также природные киллеры, которые уничтожают патологические клетки, замаскированные под Т-лимфоциты.
  8. Иммунорегуляторный индекс. Он отражает соотношение Т-цитотоксических клеток и Т-хелперов.

Расшифровкой результатов исследования занимается только врач, давший направление на анализ.

Показания к исследованию

Исследование назначается при подготовке к трансплантации

Исследование проводится по ряду показаний. В общую программу диспансеризации данный анализ не входит. Показания для проведения исследования следующие:

  • инфекционные патологии, если они затяжные или хронические;
  • сильные аллергии;
  • наличие симптомов иммунодефицита различной природы;
  • подозрения на рост опухолевых новообразований раковой или доброкачественной природы;
  • заболевания аутоиммунного характера;
  • тяжёлые плановые операции;
  • подготовка к пересадке внутренних органов;
  • длительный приём лекарственных препаратов, которые могут повлиять на лимфоциты.

В ряде случаев исследование показано и беременным женщинам, если есть риск того, что иммунная система может вызвать отторжение плода.

О чем говорят повышенные и пониженные т-лимфоциты

Пониженные Т-лимфоциты могут указывать на «иммунный паралич»

Отклонения показателя от нормы в большую сторону указывает на развитие воспаления иммунной природы.

Чаще всего явление связано с лимфолейкозом, некоторыми вирусными и бактериальными заболеваниями, а также переходом патологии в хроническую форму. Отклонение в меньшую сторону указывает на иммунологический паралич.

Такое явление обычно сопровождает период активного развития раковых опухолей. Также возможно присутствие поражений сердца.

Колебание числа В-лимфоцитов

Повышенный показатель указывает на наличие воспалений в острой или хронической формах. Заболевание может быть вызвано аллергическими, инфекционными или аутоиммунными процессами. При падении уровня компонента крови речь может идти о вирусной инфекции, раковом новообразовании или очаговом воспалении бактериальной природы.

Отклонения показателей естественных киллеров

Изменение показателя выше нормы указывает на тяжёлую, запущенную онкологию, сильные хронические воспаления или чрезмерное синтезирование антигенов против вирусов и бактерий. Понижение показателя возникает из-за высокого уровня Т-лимфоцитов и связано с состояниями, вызывающими его.

Показатели Т-цитотоксических лимфоцитов

Уровень Т-лимфоцитов изменяется при аутоиммунной патологии

Повышение показателя указывает на развитие опухолевого процесса. Также возможно тяжёлое вирусное заболевание в активной форме. Понижение показателя связано с состояниями, развивающимися по причине аутоиммунных нарушений.

Какие процессы определяются по уровню Т-хелперов

Высокие показатели указывают на воспаление в острой форме. Особенно высокие показатели отмечаются при аутоиммунных воспалениях. Снижение показателя связано с вторичным иммунодефицитом и иммунологическим параличом.

Отклонения значений по уровню Т-ЕК клеток

Увеличение показателя возможно по причине хронического воспаления, активной инфекции, присутствующей в организме длительное время, и воспалительных осложнений. Падение значения не имеет диагностической ценности.

Источник: https://gidanaliz.ru/analiz/immun/immunofenotipirovanie-limfocitov.html

Редкие фенотипы крови человека – Симптомы и лечение болезней

Фенотипирование крови что это такое

Мы все или почти все, знаем или что-то слышали, о том, что совместимость крови при переливании определяется наличием трех антигенов:

– А и B, наличие которых определяет группу крови 0(I), A(II), B(III) или AB(IV);

– D, наличие которого определяет резус-положительность Rh+, а отсутствие резус-отрицательность Rh-.

Кроме этого, есть так называемые Kell-положительные люди, которым рекомендуется сдавать плазму, а не кровь. Потому как есть у них антиген K, который может вызвать осложнение при переливании у рецепиента.

Тут оказалось, что это, таки, еще не все.

Бесцельно )) проводя время в ожидании процедур, изучая материалы, висящие на стендах – всякие там приказы, распоряжения, буклеты и просто фото, узнала, что оказывается кроме антигена Kell, есть еще “парочка” антигенов, определяющая совместимость крови.

Одна только систем Резус включает около 50 различных антигенов на эритроцитах человека. Основные антигены этой системы: D, C, c, E, e. Согласно этой системе определяются 28 групп системы Резус. Они определяются генами.

Сиcтема Kell включает более 20 антигенов и это еще не конец, исследования продолжаются. Наличие антигена Kell определяется не генами, он может образоваться у человека любой группы крови. Пишут: при частых переливаниях или повторных беременностях.

Существуют и другие эритроцитарные системы: MNS, Levis, Duffi, Kidd, но они имеют меньшее значение, так как они сравнительно редко вызывают осложнения при переливании.

Так к чему это я?

В карточке своей вычитала, что у меня следующий тип крови: O(I) DссEEkk. Т.е. из перечисленных антигенов у меня обнаружены только антигены D, с, E и k:

O(I) – первая группа – отсутствие антигенов А и В;

D – наличие антигена D, т.е. резус-положительность;

kk – наличие антигена k и отсутствие антигена K, т.е. Kell-отрицательность.

Из приказа Минздрава узнала, что определены так называемые редкие фенотипы крови:

С(w)Cdee, ccDEE, CCDEe, ccddee, CcDEE, Ccddee, CCDEE, CCddEE.

Также редкими являются фенотипы определяемые отсутствием каждого из антигенов:

k, -Jk(a) – S, – M, Lu(a), Lu(b), Fy(a), Fy(b).

Но поскольку, вопрос для меня нов, я так и не уразумела: редкая ли у меня кровь? Хотя подозреваю, что я, таки, уникальна ))))))).

Редкие фенотипы

Понятие фенотип антигенов эритроцитов человека включает в себя набор антигенов разных систем групп крови, расположенных на поверхности эритроцитов. Этот набор для каждого человека индивидуален.

Поэтому при переливании крови и эритроцитарной массы необходимо учитывать совместимость не только по эритроцитарным антигенам системы АВО и резус-фактору, но и по другим эритроцитарным антигенам различных систем.

Антигены системы резус встречаются со следующей частотой: Д – 85 %; С – 70 %; с – 80 %; Е – 30 %; е – 97,5 %. Антигены системы резус обладают способностью вызывать образование иммунных антител.

Наиболее активным в этом отношении является антиген Д, который и подразумевается под термином «резус – фактор».

Именно по наличию или отсутствию антигена Д все люди делятся на резус – положительных и резус – отрицательных.

Распределение фенотипов резус-системы у D-положительных доноров

Фенотипы%CcDee38CcDEe17CCDee22ccDEe16,6ccDEE2,4ccDee3,4CcDEE0,08CCDEe0,3

Редким фенотипом крови считается фенотип редко встречающийся в популяции. К примеру, фенотип ccddee – резус-отрицательный имеют около 15% населения, а фенотип ссDEE – 2%, (отсутствует антиген е).

Фенотип крови по системе РЕЗУС (Rh) отрицательный – ссddee или (C-,c+,C W -, D-,E-,e+) относится к редким фенотипам крови.

При необходимости переливания крови реципиенту, имеющего такой фенотип, это становится жизненно важно, так как на отсутствующие у реципиента антигены, организм может вырабатывать антитела.

Чтобы избежать всевозможных осложнений, каждому человеку необходимо знать свой фенотип крови. Сделать это можно в специализированной иммуносерологической лаборатории ККЦК №1, где произведут фенотипирование образца вашей крови по всем иммуногенно- значимым системам крови.

Группа крови ребенка

С открытием Карла Ландштейнера, австрийского иммунолога, в 1901 году групп крови стало понятно, почему в некоторых случаях переливание крови проходит успешно, а в некоторых заканчивается трагически. Ученый обнаружил, что иногда происходит склеивание эритроцитов, вызывающее смерть человека.

Так, в эритроцитах выделили природные антигены-агглютиногены A и B, а в плазме крови обнаружили антитела к ним-агглютиниты α и β. Агглютиногены наследуются от родителей, они врожденные и неизменны в течение всей жизни. В то время как агглютинины отсутствуют в плазме крови младенцев.

информацияОни вырабатываются в течение первого года жизни в зависимости от наличия собственных антигенов (агглютиногенов), содержащихся в крови (например, если у ребенка вторая группа крови, то агглютинин α образоваться не может).

Также на их синтез оказывают влияние вещества, которые поступают с пищей и синтезируются микрофлорой кишечника.

Была обнаружена еще одна особенность: при встрече одноименных белков (A и α, β и B), происходит реакция склеивания эритроцитов (агглютинация), что и объясняло трагические случаи после переливания крови. Поэтому у одного человека не может быть одноименных агглютиногенов и агглютининов (A и α, B и β).

Используя эти знания, было выделено четыре группы крови:

  • I (O) группа-агглютиногенов в эритроцитах нет, в плазме присутствуют агглютинины α и β;
  • II (A) группа — в эритроцитах содержится агглютиноген A, а в плазме агглютинин β;
  • III (B) группа — в плазме содержится агглютинин α, в эритроцитах — агглютиноген B;
  • IV (AB) — в эритроцитах присутствуют агглютиногены A и B, агглютининов в плазме нет;

Итак, группа крови — врожденное сочетание определенных антигенов (агглютиногенов), содержащихся в эритроцитах и антител к ним (агглютининов) в плазме крови.

Как наследуется группа крови

Группа крови и резус-фактор ребенка наследуется от мамы и папы и никогда не меняется. Зная, какая группа крови у родителей, можно предположить, какая может быть кровь у их малыша. Она определяется наличием или отсутствием (в случае первой группы крови) агглютиногенов. Информация о последних закодирована в паре генов, которые могут быть трех видов: J A , J B или j 0.

В генетике различают два понятия: генотип и фенотип. Генотип — набор генов. В то время как фенотип-это внешнее проявление конкретного признака, зависящее от генотипа и факторов внешней среды. Так люди с одним фенотипом (в нашем случае с одинаковой группой крови) могут иметь разный набор генов. Зависимость групп крови от генотипа представлены в таблице 1.

Таблица 1. Генотип и фенотип групп крови

ФенотипГенотип
I (O)j 0 j 0
II (A)-J A J A , J A J 0
III (B)J B J B , J B J 0
IV (AB)J A J B

Из таблицы видно, что люди со второй и третьей группой крови могут иметь два варианта сочетания генов, а вот первой и четвертой — только одно.

Именно поэтому у мамы и папы со второй группой крови ребенок может иметь помимо аналогичной родительской и первую группу крови. Такое возможно, если у обоих генотип J A J 0 .

При встрече двух генов J 0 , у ребенка будет генотип j 0 j 0 , что соответствует первой группе крови, а в случае, если к малышу попадут только гены J A или от одного J A , а от другого J 0 , ребенок будет иметь вторую группу крови.

Другие возможные комбинации наследования группы крови представлены ниже в таблице 2.

Таблица 2. Возможные группы крови у детей в зависимости от группы крови родителей.

Группа крови отца
I (O)II (A)III (B)IV (AB)
Группа крови материI (O)I (O)I (O) или II (A)I (O) или III (B)II (A) или III (B)
II (A)I (O) или II (A)I (O) или II (A)I (O) или II (A) или III (B) или IV (AB)II (A) или III (B) или IV (AB)
III (B)I (O) или III (B)I (O) или II (A) или III (B) или IV (AB)I (O) или III (B)II (A) или III (BA) или IV (AB)
IV (AB)II (A) или III (B) или IV (AB)II (A) или III (B) или IV (AB)II (A) или III (B) или IV (AB)II (A) или III (B) или IV (AB)

Из таблицы видно, что не всегда группа крови ребенка совпадает с группой крови мамы или папы.

Однако можно выделить несколько закономерностей:

  • У родителей, имеющих первую группу крови, не может быть ребенка с другой группой крови;
  • Если хоть у одного родителя первая группа крови, то у ребенка не может быть четвертой группы крови;
  • Если хоть у одного родителя четвертая группа крови, то у ребенка не может быть первой группы крови.

Источник: https://medportal-24.ru/redkie-fenotipy-krovi-cheloveka/

Фенотип крови что это такое

Фенотипирование крови что это такое

Итак, группа крови — врожденное сочетание определенных антигенов (агглютиногенов), содержащихся в эритроцитах и антител к ним (агглютининов) в плазме крови.

Современная специализированная медицинская помощь предусматривает компонентную трансфузиологическую помощь.
Только квалифицированный врач может поставить диагноз и дать рекомендации по лечению исходя из индивидуальных особенностей конкретного пациента.

Rh (C, E, c, e), Kell – фенотипирование

Оказалось, что группа крови не только является характерным наследственным признаком, но и оказывает сильнейшее развитие на саму личность, ее взгляды и убеждения. Кроме того, зная такую особенность организма, вы можете быть уверены, какие продукты ваш организм будет усваивать значительно лучше, чем другие.

Если победитель аукциона уклоняется от заключения контракта, информация об этом направляется в Реестр Недобросовестных Поставщиков (РНП).

Фенотип – это совокупность всех характеристик, которые присущи индивиду на определенной стадии развития. Знания о фенотипе позволяют за минимальное время охарактеризовать человека и особенности его характера.

В случае резус-конфликта матери и плода, в ответ на внедрение чужеродных антигенов последнего, в организме матери вырабатываются антитела. При наблюдении за беременной определяют наличие этих резус-антител и их количество (титр).

При определенных значениях титра для предотвращения развития у плода гемолитической болезни, необходимо лечение беременной.

Повышение значений (положительный результат)

Если вы хотя бы раз в жизни сдавали кровь в качестве донора, то наверняка узнали про себя некоторую интересную новую информацию, связанную с индивидуальными особенностями вашего организма.

Как понять, относится ли ваш фенотип крови к редкому типу? И что это вообще за странная характеристическая особенность организма ?

Определение антигенов эритроцитов помогает избежать иммунных конфликтов в организме человека, облегчает контроль и лечение уже возникших конфликтов.

Чтобы избежать всевозможных осложнений, каждому человеку необходимо знать свой фенотип крови. Сделать это можно в специализированной иммуносерологической лаборатории ККЦК №1, где произведут фенотипирование образца вашей крови по всем иммуногенно- значимым системам крови.

Объясняем азы генетики: первый и второй законы Менделя. Чем отличается генотип от фенотипа? Почему у родителей-блондинов может быть темн..

Следующим аспектом, влияющим на совместимость крови людей, является определение резус-фактора. К этим антигенам относятся: D, d, С, с, Е, е. Между собой они образуют пары, такие как DD, dd, СС, сс, ЕЕ, ее, Dd, Cc, Ее.

Если вы хотя бы раз в жизни сдавали кровь в качестве донора, то наверняка узнали про себя некоторую интересную новую информацию, связанную с индивидуальными особенностями вашего организма.

Как понять, относится ли ваш фенотип крови к редкому типу? И что это вообще за странная характеристическая особенность организма? Именно поэтому у мамы и папы со второй группой крови ребенок может иметь помимо аналогичной родительской и первую группу крови.

Согласно этой версии, обладатели первой группы крови наделены сильным здоровьем, менее подвержены психическим заболеваниям, а также считаются обладателями сильной воли и духа. Питаться им рекомендуется мясом птицы и говядиной.

Определение антигенной структуры эритроцитов имеет важное клиническое значение. Оно позволяет избежать иммунных конфликтов при переливании крови и ее компонентов, при вынашивании «сложной» беременности. Это исследование необходимо для того, чтобы врачи могли эффективно проводить лечение возникших осложнений.

Годность приготовленного раствора микробной протеазы (протеазы-С), сохраняемой при 4-8°С,- 1 неделя, раствора папаина — 48 ч. Порошкообразные ферментные препараты при 4-8°С сохраняют свою активность в течение нескольких лет.

Генотип — набор генов. В то время как фенотип-это внешнее проявление конкретного признака, зависящее от генотипа и факторов внешней среды. Так люди с одним фенотипом (в нашем случае с одинаковой группой крови) могут иметь разный набор генов. Зависимость групп крови от генотипа представлены в таблице 1.

Возможно также использование любой другой серологически активной протеазы микробного (субтилизин, проназа) или растительного (папаин, бромелин) происхождения.

Генотип — набор генов. В то время как фенотип-это внешнее проявление конкретного признака, зависящее от генотипа и факторов внешней среды. Так люди с одним фенотипом (в нашем случае с одинаковой группой крови) могут иметь разный набор генов. Зависимость групп крови от генотипа представлены в таблице 1.

В этом разделе вы можете узнать, сколько стоит выполнение данного исследования в вашем городе, ознакомиться с описанием теста и таблицей интерпретации результатов.

При необходимости, подготовьте документы и информацию, предусмотренные пунктами 1, 3 — 5, 7 и 8 части 2 статьи 62, частями 3 и 5 статьи 66 44-ФЗ.

Известно более 400 антигенов эритроцитов, объединяемых в разные генетические системы, клинически значимы из них лишь немногие. Наличие или отсутствие этих белков (фенотип эритроцитарных антигенов) преимущественно определяется наследованием от родителей и не меняется в течение жизни.

Фенотип – это все признаки биологического индивида в конкретный момент его жизни. Формирование происходит при участии генотипа под влиянием окружающей среды. Таким образом, фенотип является различной реализацией генотипа в каждом конкретном случае.

Одна только систем Резус включает около 50 различных антигенов на эритроцитах человека. Основные антигены этой системы: D, C, c, E, e. Согласно этой системе определяются 28 групп системы Резус. Они определяются генами.

Сиcтема Kell включает более 20 антигенов и это еще не конец, исследования продолжаются. Наличие антигена Kell определяется не генами, он может образоваться у человека любой группы крови. Пишут: при частых переливаниях или повторных беременностях. Фенотип D+Cw-C+c+E-e+K-MNfkafkb, иммунных тел — нет. Как мой фенотип перевести в одну цифру? И редкий ли у меня фенотип?

Проверка совместимости крови проводится в первую очередь по совпадению антигенов, обладающих различной силой воздействия, которая также называется иммуногенностью.

Те, кто родился с третьей группой крови, как правило, легко приспосабливаются к новым жизненным ситуациям, а также склонны к перфекционизму. Любят поступать так, как хочется им самим, и достаточно свободолюбивы. Лучше всего им подходит баранина.

Повышения нормы наблюдаются при следующих заболеваниях

Обозначения Вайнера является более сложным и громоздким для повседневного использования. В связи с более простым объяснением теория Фишер-Раса стала более широко используемой.

При переливании положительной крови Rh- и Kell-отрицательным реципиентам у последних могут возникнуть посттрансфузионные осложнения. Во время беременности у женщин с резус-отрицательной кровью может развиться изосенсибилизация по резус-фактору. Это происходит, если плод унаследовал положительный Rh-фактор отца. При первой беременности это происходит редко.

С открытием Карла Ландштейнера, австрийского иммунолога, в 1901 году групп крови стало понятно, почему в некоторых случаях переливание крови проходит успешно, а в некоторых заканчивается трагически. Ученый обнаружил, что иногда происходит склеивание эритроцитов, вызывающее смерть человека.

Что такое фенотип? Понятие, основные признаки, взаимодействие с генотипом

Иммунологический подбор донора и реципиента при переливаниях крови, ее компонентов и трансплантациях костного мозга / Сост. Шабалин В. Н., Серова Л.

Rh фактор впоследствии был использован для антигенов и анти-Rh антител, найденных у тех людей, которые были описаны ранее Левиным и Стетсоном.

Пройти тест по теме: goo.gl/LbDNd8 Перейти к тренажерам: goo.gl/fKKivu Домашнее задание от Домашней Школы InternetUrok: goo.gl/r8cUgd Задать вопрос к.. Вместе с тем, другие антигены этой системы группы крови, также, являются клинически значимыми. Эти антигены, указаны отдельно (см. ниже: номенклатура Rh).

В ниже приведенной таблицы можна увидеть, что большинство фенотипов Rh могут быть образованы несколькими разными генотипами Rh.

Согласно статистическим данным, частота «встречаемости» в процентном соотношении всего населения планеты составляет: I – около 34%; II – 38%; III – 21%; IV группа – 8%. Как видите, самой редкой группой крови является VI. Отвлекаясь от основной темы, хочется обратить внимание на то, что существует теория зависимости характера и интересов человека от его группы крови.

В нашей семье с 2016 года мама после очередного инсульта осталась лежачей, пытались реабилитировать, нанимали массажистов, но увы, полностью обездвижена. Врачи говорят что сердце в норме, значит при хорошем уходе мама может прожить достаточно долго, слышала про случаи когда лежачие люди жили более 10 лет.

Фенотипирование эритроцитов

Фенотипирование крови что это такое

МЕНЕЕ ИММУНОГЕННЫЕ АНТИГЕНЫ ЭРИТРОЦИТОВ

Фенотипирование эритроцитов по антигенам К и с

Наиболее выраженными антигенными свойствами среди минорных антигенов эритроцитов обладают факторы Келл (К) и с (система Резус). Фактор Келл стоит на втором месте после фактора D в шкале трансфузионно опасных антигенов эритроцитов. Третье место занимает фактор с.

Индекс сенсибилизации населения (процент лиц с повышенным риском посттрансфузионного осложнения) к обоим указанным факторам в настоящее время высок.

По данным С. И. Донскова (1996), сенсибилизационный индекс населения в отношении фактора К составляет условно 18% (9% “первичных” реципиентов + и 9% “первичных” беременных) на каждый расчетный год.

В абсолютных цифрах сенсибилизационный индекс по антигену К системы Келл с учетом 10 предшествующих лет составляет по расчетным данным 8-10 млн человек, то есть примерно 6-7% всех потенциальных реципиентов на данную точку отсчета.

С тем, чтобы избежать посттрансфузионные осложнения по антигену К, необходимо выдавать в лечебно-профилактические учреждения только К-отрицательные эритроциты.

В кабинетах, отделениях и станциях переливания крови целесообразно производить определение антигена К, как обязательное, у всех доноров наряду с группой и резус-фактором, после чего отбирать К-положительные образцы крови, не допуская их к выдаче для переливания.

К-положительным донорам целесообразно рекомендовать другой вид донорства (плазмы, тромбоцитов, лейкоцитов и др.), но не эритроцитов.

Определение антигена К в эритроцитах производят с помощью общепринятых методов исследования:

  1. Непрямая реакция Кумбса.
  2. Желатиновый метод в пробирках.
  3. Экспресс-метод на плоскости с сывороткой анти-К универсальной (“Гемостандарт”, Москва).

Для исследования экспресс-методом используют свежие (не более двух дней хранения), неотмытые или отмытые эритроциты, взятые со дна пробирки после отстаивания от сыворотки (3-я фракция крови), плазмы с консервантом или физиологического раствора. Используют также цельную кровь, взятую из прокола пальца непосредственно перед исследованием.

Ход определения:

  • на плоскость помещают две капли (1 мл) сыворотки анти-К и каплю эритроцитов в количестве 1/3 объема взятой сыворотки;
  • капли перемешивают стеклянной палочкой и при плавном периодическом покачивании пластинки наблюдают за ходом реакции в течение 5 мин.

При положительном результате агглютинация эритроцитов появляется к 30 с – 1 мин и в дальнейшем усиливается, при отрицательном результате агглютинация отсутствует. По истечении 3-4 мин в реагирующую смесь добавляют 1-2 капли физиологического раствора для снятия возможной неспецифической агрегации эритроцитов и продолжают наблюдение до истечения 5 мин, после чего регистрируют результат.

Распространенность антигена с (система резус) составляет около 80%. Около 20% людей не содержат антигена с и являются гомозиготными по аллельному антигену С. Соответственно, этим пациентам в 80% случаев переливают эритроциты, содержащие антиген с, что ведет к сенсибилизации и риску развития посттрансфузионного осложнения. Индекс сенсибилизации населения к антигену с составляет около 32%.

С тем, чтобы уменьшить индекс сенсибилизации населения и избежать посттрансфузионных осложнений, обусловленных несовместимостью по этому антигену, целесообразно у каждого резус-положительного реципиента определять с антиген и при его отсутствии переливать реципиенту кровь доноров, гомозиготных по антигену С, т.е. с-отрицательных. На станциях и в отделениях переливания крови целесообразно иметь резервную группу таких доноров или запас с-отрицательной эритроцитной массы.

Антиген с определяют со стандартной сывороткой анти-с (“Гемостандарт”, Москва) теми же методами, что и антиген D. Для выявления антигена С целесообразно использовать Цоликлон “Анти-С-супер” (моноклональные анти-С-антитела) (“Гематолог”, Москва). Цоликлон “Анти-С-супер” не содержит антител других специфичностей и не требует проведения контроля растворителя.

Фенотипирование эритроцитов по антигенам системы Lewis

Выявление Lewis-антигенов Lеа, Lеb ферментным методом с использованием неполных стандартных антител анти-Lе(а), анти-Lе(L) (“Гемостандарт”, Москва) состоит из приготовления рабочего ферментного раствора, обработки (энзимирования) этим раствором исследуемых и стандартных (контрольных) эритроцитов и постановки реакции агглютинации энзимированных эритроцитов.

Ход определения:

  1. Приготовление рабочего ферментного раствора.

    Для приготовления рабочего ферментного раствора обычно используют протеазу-С (комплекс протеаз, продуцируемых культурой Arc. chrysogenum).

    Возможно также использование любой другой серологически активной протеазы микробного (субтилизин, проназа) или растительного (папаин, бромелин) происхождения.

    Необходимый объем 0,1% ферментного раствора готовят путем растворения в течение нескольких минут при комнатной температуре навески используемого ферментного препарата в физиологическом растворе (например, 10 мг фермента растворяют в 10 мл физраствора). Раствор микробных протеаз готов для использования сразу же после растворения фермента.

    Для развития ферментативной активности раствора папаина его выдерживают 1 ч при комнатной температуре после растворения препарата. Годность приготовленного раствора микробной протеазы (протеазы-С), сохраняемой при 4-8°С,- 1 неделя, раствора папаина – 48 ч.

    Порошкообразные ферментные препараты при 4-8°С сохраняют свою активность в течение нескольких лет.

  2. Энзимирование эритроцитов:
    • исследуемые и стандартные (Lеа+b-, Lеа-b+) эритроциты дважды отмывают физраствором;
    • к 1 объему осадка отмытых эритроцитов добавляют 5 объемов ферментного раствора (например, к 3 каплям эритроцитов добавляют 15 капель ферментного раствора);
    • эритроциты и ферментный раствор перемешивают;
    • пробирки с ингредиентами помещают в суховоздушный термостат с температурой 37°С на 45 мин или на 30 мин в водяную баню с той же температурой;
    • после энзимирования эритроциты дважды отмывают от ферментного раствора;
    • готовят 5-7,5% рабочую взвесь энзимированных эритроцитов в физиологическом растворе.
  3. Постановка реакции агглютинации энзимированных эритроцитов:
    • для каждого образца исследуемых и стандартных (контрольных) эритроцитов на плоскость помещают по 1 капле сыворотки анти-Lе(а) и анти-Lе(L);
    • к помещенным на плоскость реагентам добавляют по 1 капле энзимированных эритроцитов;
    • реагенты перемешивают;
    • инкубируют (в покое) 10 мин при комнатной температуре;
    • учитывают результаты реакции агглютинации энзимированных эритроцитов невооруженным глазом или с помощью 4-кратной лупы (при хорошем естественном или достаточном искусственном освещении, при осторожном покачивании плоскости) – по наличию или отсутствию агглютинации.

Результат учитывается как истинный после проверки контрольных проб, то есть при наличии агглютинации с положительным контролем и ее отсутствии с отрицательным контролем.

Распространенность фенотипов системы Lewis у доноров на северо-западе России: Lеа-b- – 20%, Lеа+b- – 3-5%, Lеа-b+ 70%, Leaа+b+ – встречается редко.

Страница 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10всего страниц: 10

ЛИТЕРАТУРА[показать] .

  1. Иммунологический подбор донора и реципиента при переливаниях крови, ее компонентов и трансплантациях костного мозга / Сост. Шабалин В. Н., Серова Л. Д., Бушмарина Т.Д. и др.- Ленинград, 1979.- 29 с.
  2. Калеко С. П., Серебряная Н. Б., Игнатович Г. П. и др.

    Аллосенсибилизация при гемокомпонентной терапии и оптимизация подбора гистосовместимых пар “донор-реципиент” в военных лечебных учреждениях/ Методич. рекомендации.- С.-Петербург, 1994.- 16 с.

  3. Практическая трансфузиология / Ред. Козинец Г. И., Бирюкова Л. С., Горбунова Н.А. и др.- Москва: Триада-Т, 1996.- 435 с.

  4. Руководство по военной трансфузиологии / Ред. Э. А. Нечаев. – Москва, 1991. – 280 с.
  5. Руководство по трансфузионной медицине / Под ред. Е. П. Сведенцова. – Киров, 1999.- 716с.
  6. Румянцев А. Г., Аграненко В. А. Клиническая трансфузиология.- М.: ГЭОТАР МЕДИЦИНА, 1997.- 575 с.
  7. Шевченко Ю.Л., Жибурт Е.Б.

    , Безопасное переливание крови: Руководство для врачей.- СПб.: Питер, 2000.- 320 с.

  8. Шевченко Ю.Л., Жибурт Е.Б., Серебряная Н.Б. Иммунологическая и инфекционная безопасность гемокомпонентной терапии.- СПб.: Наука, 1998.- 232 с.
  9. Шиффман Ф.Дж. Патофизиология крови / Пер. с англ.- М.- СПб.: Издательство БИНОМ – Невский диалект, 2000.- 448 с.

  10. Blood transfusion in Clinical Medicine / Ed. P.L.Mollison, C. P. Engelfriet, M. Contreras.- Oxford, 1988.- 1233 p.

Источник: Медицинская лабораторная диагностика, программы и алгоритмы. Под ред. проф. Карпищенко А.И., СПб, Интермедика, 2001

Источник: http://bono-esse.ru/blizzard/Lab/MedlabDs/PK/fenotyp_Er.html

Иммунофенотипирование лимфоцитов – проведение анализа и расшифровка

Фенотипирование крови что это такое

Одним из методов клинической диагностики является исследование крови способом иммунофенотипирования лимфоцитов. В его основе реакция между антителами и антигенами, которая используется для определения типов клеток крови, взятых из образцов биологического материала – крови, лимфатических узлов или костного мозга.

Анализ проводится с использованием специальных маркеров или меток, которые присоединяются к антигенам клеток. С помощью лабораторного оборудования отслеживают маркеры, производят подсчет клеток крови.

Знание количества каждой из них позволяет квалифицировать опухолевые заболевания, подтвердить диагноз пациенту с определением конкретного его типа, например: достоверно установить вид лимфомы, лейкоза.

Такая точная диагностика позволяет сделать выбор наиболее эффективной схемы лечения.

Когда назначают исследование?

Фенотипирование видов лимфоцитов назначают для диагностики ряда заболеваний. Иммунологи назначают исследование, если имеются основания заподозрить одни из них или при наличии «ярких» признаков других.

Например: расшифровка количества лимфоцитов с определенным фенотипом понадобится при:

  • инфекционных заболеваниях, поражении хронического характера или если болезнь имеет затяжной характер,
  • аллергических реакциях организма,
  • проявлении устойчивых признаков и симптомов, указывающих на иммунодефицит врожденного или приобретенного свойства,
  • подозрении на опухолевые образования доброкачественной или злокачественной природы,
  • заболеваниях аутоиммунного типа, спровоцированных расстройством защитной системы, поражением собственного организма,

Диагностика периферической крови требуется в других случаях. Ее назначат перед серьезным оперативным вмешательством, которое требуется больному в плановом порядке.

При иммунофенотипировании врач узнает все процессы иммунного характера, происходящие у конкретного больного, что позволяет скорректировать защитные процессы, избежать клеточного поражения, и нормализовать их работу.

Большое значение для врача имеют показатели различных видов кровяных телец, Т-клеточный состав крови в послеоперационный период, особенно в случаях с развитием патологических процессов.

Метод применяют и для оценки состояния человека, которому требуется трансплантация органов или проведена операция – анализ на иммунофенотипирование проведут на подготовительном этапе и во время послеоперационного восстановления, чтобы предупредить поражение и отторжение органа.

Направление на анализ получают пациенты, лимфоциты которых могут изменить качественный и количественный состав из-за лечения заболеваний медикаментами определенных групп – иммуномодуляторами, иммунодепрессантами или цитостатиками.

Нормы и референсные значения содержания в крови частиц определенного вида зависят от возраста пациента.

Врачи для оценки показателей используют специальные таблицы, в которых указаны оптимальные значения, пределы отклонений.

Какие проблемы отражают повышенные и пониженные Т-клеточные лимфоциты

Результат анализа покажет отклонение от нормы по количеству Т-клеточных лимфоцитов. Повышение их количества свидетельствует об иммунном воспалении, поражении или гиперактивности защитных процессов пациента.

Такое превышение нормы вызывают заболевания – лимфолейкоз (острая и хроническая стадии), ряд вирусных и бактериальных инфекций в начале развития болезни.

Увеличение Т-лимфоцитов возможно при изменении характера заболевания, переход его в хроническую форму.

Если у обследуемого абсолютное число Т-клеточных лимфоцитов снижено, говорят о развитии иммунологического паралича. Он сопровождает воспалительный процессы, может указывать на развитие злокачественных опухолевых новообразований. Такой показатель выявляется, если больная сердечная мышца – миокард, при некоторых сложных травмах, его снижение вызывает курение.

МедСостав
Добавить комментарий